1.冷凍管應如何解凍？

　　取出冷凍管后，須立即放入37℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管的爆裂。

　　2.細胞冷凍管解凍培養時，是否應馬上去除DMSO？

　　除少數特別注明對DMSO敏感的細胞外，絕大部分細胞株（包括懸浮性細胞），在解凍之后，應直接放入含有10~15 ml新鮮培養基的培養角瓶中，待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO即可，如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附的問題。

　　3.可否使用與原先培養條件不同的培養基？

　　不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應的細胞培養基，若驟然使用和原先提供培養條件不同的培養基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活。

　　4.可否使用與原先培養條件不同的血清種類？

　　不能。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。

　　5.何謂FBS，FCS，CS，HS？

　　FBS（fetal bovine serum）和FCS（fetal calf serum）是相同的意思，兩者都是指胎牛血清，FCS是錯誤的使用字眼，請不要再使用。CS（calf serum）則是指小牛血清。HS（則是指馬血清。

　　6.培養細胞時應使用5%或10%CO2？或根本沒有影響？

　　一般培養基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統，而培養基中NaHCO3的含量將決定細胞培養時應使用的CO2濃度。當培養基中NaHCO3含量為每公升3.7 g時，細胞培養時應使用10%CO2；當培養基中NaHCO3為每公升1.5 g時，則應使用5%CO2培養細胞。

　　7.何時須更換培養基？培養基中是否須添加抗生素？

　　視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數據上的更換時間，按時更換培養基即可。

　　除于特殊篩選系統中外，一般正常培養狀態下，培養基中不應添加任何抗生素。

　　一℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽vapor phase長期儲存。

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